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Ampicillin抗性:pGEX-4T-1载体提供氨苄青霉素抗性,方便筛选含有质粒的细菌。 瞬时表达:该载体支持瞬时表达,适用于快速蛋白生产和功能研究。 诱导表达:通过添加IPTG可以诱导目标蛋白的表达,允许研究者控制蛋白表达的时间和水平。
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pGEX-4T-1质粒是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达,LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达,防止其影响细菌生长。 表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割,再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。
pGEX-4T-1载体是一种常用的原核表达载体,具有Amp抗性,质粒大小为4.9kb。 该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有tac启动子、GST标签序列,是一种高效的蛋白表达载体。
为了补充pGEX载体,目前还有GST载体的测序引物,可立即用于pGEX载体中插入的双链DNA的测序。 多种大肠杆菌宿主菌株可用于pGEX载体的克隆和表达。 E.coli BL21,一种用于重组蛋白的最优表达的蛋白酶缺陷的冻干大肠杆菌宿主菌株,也可单独购买。 (未完,待续) ...
pGEX-6P有三种载体,以方便你从不同的酶切位点插入都不会造成移码突变。 另外值得一提的是pGEX-2TK是专门为了体外标记融合产物以检测表达情况而设计的。 它含有来自心肌的cAMP依赖性蛋白激酶催化亚单位的识别位点,这个位点位于GST和多克隆位点之间。