为探究弓形虫（ Toxoplasma gondii ）跨菌株和宿主的毒力因子，研究人员开展了针对弓形虫分泌组的体内 CRISPR-Cas9 筛选研究。结果发现致密颗粒蛋白 12（GRA12）是关键毒力因子，其缺失影响寄生虫存活。该研究有助于深入理解弓形虫致病机制。

本研究创新性采用单引导RNA（sgRNA）结合Cas9或TREX2融合增强型Cas9（EDCas9）基因编辑系统，成功修复USH2A基因c.7595-2144A>G深内含子变异引发的剪接缺陷。通过迷你基因模型和患者源性成纤维细胞实验证实，EDCas9能产生更大规模定向缺失，稳定破坏异常剪接信号 ...

在基因组学领域，DNA长期以来被视为生命的“蓝图”，负责储存和传递遗传信息。但随着科学研究的深入，我们逐渐认识到，RNA不仅仅是DNA的“信息传递者”。它不仅在基因表达中扮演着至关重要的角色，甚至能够决定细胞的命运和生命的进程。

设计时要严格把关，筛选出高特异性的 sgRNA，尽可能避免脱靶现象，其长度通常固定为 20bp。与此同时，Cas9 的选择也不容忽视，一般常用来源于化脓链球菌的 SpCas9，并且要保证它与所选的 sgRNA 能够完美兼容。另外，如果实验需要引入特定突变或者大片段缺失 ...